Bio-Rad伯樂(lè)T100擴(kuò)增儀pcr儀

?樣本容量?：支持96個(gè)0.2 ml試管、0.2 ml八聯(lián)管或1個(gè)96孔板?。

?溫度范圍?：4-100°C?。

?溫度精度?：±0.5°C設(shè)定溫度?。

?升降溫速率?：最大升降溫速率為4°C/sec，平均升降溫速率為2.5°C/sec?。

?溫度均勻性?：±0.5°C（孔間溫度差），在30秒內(nèi)達(dá)到目標(biāo)溫度?。

?梯度范圍?：30-100°C，溫度差異范圍為1-25°C?。

?顯示屏?：5.7英寸VGA彩色觸摸屏?。

?內(nèi)存?：500個(gè)典型程序，USB閃存驅(qū)動(dòng)器可無(wú)限擴(kuò)展?。

?尺寸和重量?：尺寸為26 x 47 x 23 cm，重量為9 kg?。

Bio-Rad伯樂(lè)T100擴(kuò)增儀pcr儀

伯樂(lè) T100 PCR 儀標(biāo)準(zhǔn)操作流程 (SOP)

準(zhǔn)備工作:

開(kāi)啟儀器電源： 按下儀器背面的電源開(kāi)關(guān) (通常位于左下角或右下角)。

儀器自檢與預(yù)熱： 儀器啟動(dòng)后會(huì)進(jìn)行自檢，完成后主屏幕會(huì)顯示系統(tǒng)信息、當(dāng)前模塊溫度和狀態(tài) (通常顯示“Idle"或“Standby")。儀器可能需要幾分鐘達(dá)到設(shè)定的待機(jī)溫度 (通常是 4°C 或 10°C)。

準(zhǔn)備 PCR 反應(yīng)體系:

在冰上或冷板上，按照你的實(shí)驗(yàn)方案 (Protocol) 在 PCR 管或 PCR 板中配制好所有反應(yīng)混合液。

蓋緊蓋子： 確保所有反應(yīng)管的蓋子或 PCR 板的封膜都蓋緊、密封 ，防止加熱過(guò)程中蒸發(fā)或污染。

短暫離心 (可選但推薦)： 將配好的反應(yīng)管/板短暫離心 (例如 5-10 秒)，使液體沉到管底/孔底，并去除管壁/孔壁的氣泡。

放置樣品:

打開(kāi)熱蓋： 按下儀器正面右上角的 “Lid" 按鈕抬起熱蓋。熱蓋會(huì)升起。

放置樣品架 (樣本塊適配器)：

如果使用的是單管或排管，通常是將它們直接放入樣本塊 (Sample Block) 的孔中。

如果使用的是 96 孔 PCR 板，需要先將 銀色的金屬樣品架 (Sample Block Adapter) 小心地放入樣本塊中。注意方向： 樣品架有定位銷(xiāo)，確保它卡入樣本塊的定位孔中，放置平穩(wěn)。

將蓋好蓋子的 PCR 管或密封好的 PCR 板小心地放入樣品架/樣本塊中。確保放置平穩(wěn)。

關(guān)閉熱蓋： 輕輕按下熱蓋中央，直到聽(tīng)到輕微的“咔嗒"聲或感覺(jué)到它自動(dòng)吸合鎖緊。務(wù)必確保熱蓋關(guān)閉且?jiàn)A緊！ 屏幕狀態(tài)會(huì)顯示 “Lid Closed"。

創(chuàng)建或選擇程序 (Protocol):

在主屏幕上，使用導(dǎo)航旋鈕 (中央的大旋鈕) 選擇 “Protocol" 菜單，按旋鈕確認(rèn)。

新建程序：

選擇 “New" 。

輸入程序名稱(chēng)： 使用旋鈕選擇字母和數(shù)字，輸入一個(gè)容易識(shí)別的名稱(chēng) (如 “MyGene_PCR")，按旋鈕確認(rèn)。

添加步驟： 選擇 “Add Step" 或 “Insert Step" 。

設(shè)定步驟參數(shù)：

Temp: 使用旋鈕輸入溫度值 (℃)。

Time: 使用旋鈕輸入該溫度的持續(xù)時(shí)間 (格式通常是 分:秒，如 1:30 表示 1分30秒)。

Repeat: 設(shè)置該步驟的重復(fù)次數(shù) (通常對(duì)于單個(gè)變性/退火/延伸步驟設(shè)為1)。

Goto: 設(shè)置該步驟完成后跳轉(zhuǎn)到的步驟號(hào) (用于循環(huán))。

Increment: (高級(jí)功能，梯度PCR時(shí)用) 設(shè)置溫度遞增/減量。默認(rèn)關(guān)。

Auto: (高級(jí)功能) 設(shè)置該步驟是否使用預(yù)設(shè)的快速升溫/降溫速率。通常保持默認(rèn)。

按旋鈕確認(rèn)該步驟設(shè)置。

重復(fù)添加步驟： 根據(jù)你的 PCR 程序，依次添加所有步驟：

初始變性 (Initial Denaturation)： 如 95°C， 5 min。

循環(huán)主體 (Cycling)： 通常包括：

變性 (Denaturation)： 如 95°C， 30 sec。

退火 (Annealing)： 如 55-60°C， 30 sec (具體溫度根據(jù)引物Tm值優(yōu)化)。

延伸 (Extension)： 如 72°C， 1 min/kb (根據(jù)產(chǎn)物長(zhǎng)度設(shè)定)。

設(shè)置循環(huán)次數(shù)： 在循環(huán)主體的第一個(gè)步驟 (通常是變性步驟) 中，將 Repeat 設(shè)置為 0 ，并在 Goto 中設(shè)置為循環(huán)體末尾的步驟號(hào) (通常是延伸步驟)。然后在循環(huán)體最后一個(gè)步驟 的 Goto 中設(shè)置跳轉(zhuǎn)到循環(huán)體的第一個(gè)步驟 。同時(shí)在某個(gè)步驟設(shè)置 Repeat 為你需要的總循環(huán)次數(shù) (如 30x)。(更直觀(guān)的方式是添加一個(gè)“Cycle"步驟來(lái)設(shè)置循環(huán)次數(shù)，但T100基礎(chǔ)操作通常是按上述設(shè)置跳轉(zhuǎn))。

終延伸 (Final Extension)： 如 72°C， 5-10 min。

保溫 (Hold)： 如 4°C 或 10°C 。

設(shè)定熱蓋溫度: 在主程序編輯界面或?qū)ｉT(mén)的設(shè)置菜單中，找到 Lid Temp 選項(xiàng)。強(qiáng)烈建議將熱蓋溫度設(shè)置為比反應(yīng)體系中最高溫度高 5-10°C (例如，如果最高變性溫度是95°C，建議設(shè)Lid Temp為105°C)。這是防止管內(nèi)液體在管蓋頂部冷凝的關(guān)鍵！按旋鈕確認(rèn)。

保存程序： 完成所有步驟設(shè)置后，選擇 “Save" (通常按 “Save" 軟鍵 F1-F5 中的一個(gè))。輸入的名稱(chēng)會(huì)出現(xiàn)在程序列表中。

選擇現(xiàn)有程序： 如果在 “Protocol" 菜單中已有保存好的程序，使用旋鈕滾動(dòng)選擇所需程序名稱(chēng)，按旋鈕確認(rèn)加載。

運(yùn)行前確認(rèn):

程序加載后，屏幕會(huì)顯示程序的詳細(xì)信息：名稱(chēng)、各步驟溫度/時(shí)間、循環(huán)次數(shù)、總預(yù)計(jì)運(yùn)行時(shí)間等。

再次檢查：

熱蓋是否緊閉？ (狀態(tài)顯示 Lid Closed)

樣品是否放置平穩(wěn)？

程序參數(shù)是否正確？ (特別是關(guān)鍵溫度、時(shí)間、循環(huán)次數(shù)、熱蓋溫度)

按 “Start" 按鈕 (通常是一個(gè)綠色的實(shí)體按鈕或屏幕軟鍵)。

運(yùn)行程序:

按下 “Start" 后，儀器會(huì)提示確認(rèn) (通常是 “Start Run?")。選擇 “Yes" 或按 “Start" 按鈕再次確認(rèn) (取決于具體界面)。

儀器開(kāi)始運(yùn)行：

熱蓋會(huì)先升溫到設(shè)定溫度。

樣本塊開(kāi)始按照程序設(shè)定的溫度和時(shí)間進(jìn)行變化。

屏幕會(huì)實(shí)時(shí)顯示當(dāng)前運(yùn)行的步驟、剩余時(shí)間、當(dāng)前溫度、設(shè)定溫度、總剩余時(shí)間等信息。

運(yùn)行過(guò)程中，不要打開(kāi)熱蓋！ 會(huì)中斷程序并可能損壞樣品。

程序結(jié)束:

當(dāng)程序運(yùn)行到最后的保溫步驟 (如 4°C) 并達(dá)到設(shè)定溫度時(shí)，儀器會(huì)發(fā)出提示音 (嘀嘀聲)，屏幕顯示 “Run Complete" 或類(lèi)似信息，狀態(tài)變?yōu)?“Idle/Hold"。

打開(kāi)熱蓋： 按下 “Lid" 按鈕抬起熱蓋。

取出樣品： 戴好防熱手套！ 樣本塊在剛結(jié)束高溫步驟后會(huì)很燙。小心取出 PCR 管或板，轉(zhuǎn)移到冰上或下一步實(shí)驗(yàn)所需的地方。

關(guān)閉儀器或準(zhǔn)備下次運(yùn)行：

如果當(dāng)天不再使用，可以關(guān)閉儀器電源。

如果很快要運(yùn)行下一輪，可以保持儀器處于待機(jī)保溫狀態(tài) (通常是4°C)，并蓋好熱蓋。

日常維護(hù) (重要！):

清潔樣本塊和熱蓋： 定期 (如每周或每次污染風(fēng)險(xiǎn)后) 使用 不含棉絮的實(shí)驗(yàn)室紙巾 蘸取少量 70%乙醇 或異丙醇，輕輕擦拭樣本塊表面和熱蓋底部的接觸面。切勿將液體直接倒入樣本塊孔中！ 等待干燥后再使用。

清潔儀器外殼： 用濕布和溫和清潔劑清潔外殼。避免液體流入儀器內(nèi)部。

保持通風(fēng)口暢通： 確保儀器周?chē)捅巢康耐L(fēng)口不被堵塞。

關(guān)鍵注意事項(xiàng)和安全提示:

高溫燙傷： 運(yùn)行過(guò)程中和剛結(jié)束時(shí)，樣本塊和熱蓋溫度較高！務(wù)必在打開(kāi)熱蓋和取放樣品時(shí)佩戴隔熱手套。

蓋緊蓋子： PCR管蓋/PCR板封膜密封不良是實(shí)驗(yàn)失?。ㄕ舭l(fā)、污染）的常見(jiàn)原因。

設(shè)置熱蓋溫度： 這是很容易被遺忘但極其關(guān)鍵的一步！ 熱蓋溫度不足會(huì)導(dǎo)致冷凝水回流稀釋反應(yīng)液。

程序驗(yàn)證：第一次運(yùn)行新程序或重要實(shí)驗(yàn)前，建議用水或空白反應(yīng)進(jìn)行測(cè)試運(yùn)行，檢查溫度升降是否正常。

污染預(yù)防： 操作時(shí)佩戴手套，使用無(wú)核酸酶槍頭和耗材。每次使用前后清潔工作區(qū)域。定期清潔儀器表面和樣本塊。

斷電安全： 如果運(yùn)行過(guò)程中意外斷電，重新通電后儀器可能會(huì)嘗試恢復(fù)上次運(yùn)行狀態(tài)或停在保溫步驟。請(qǐng)?jiān)u估樣品狀態(tài)決定是否繼續(xù)使用或重新開(kāi)始。

遵循實(shí)驗(yàn)室 SOP： 務(wù)必嚴(yán)格遵守你所在實(shí)驗(yàn)室針對(duì) T100 PCR 儀制定的具體操作規(guī)程和安全規(guī)定。

查閱手冊(cè)： 對(duì)于高級(jí)功能 (如梯度PCR、程序鏈接、用戶(hù)自定義升溫速率等)，請(qǐng)參考隨機(jī)附帶的 Bio-Rad T100 Thermal Cycler Instruction Manual 。

知識(shí)產(chǎn)權(quán)侵權(quán)投訴:杭州仲登醫(yī)療科技有限公司不生產(chǎn)醫(yī)療產(chǎn)品及科研儀器，所有產(chǎn)品均來(lái)自產(chǎn)品的生產(chǎn)廠(chǎng)商，代理商，經(jīng)銷(xiāo)商，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系我們，我們會(huì)盡快處理!